商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞

組織來源 腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖或髓鞘構成的白質(zhì)。每個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞，是哺乳動物腦內(nèi)分布廣泛的類細胞，也是膠質(zhì)細胞中體積的種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術（銀染色）顯示此類膠質(zhì)細胞呈星形，從胞體發(fā)出許多長而分支的突起，伸展充填在神經(jīng)細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經(jīng)細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面，彼此連接構成膠質(zhì)界膜。細胞剛分離時呈圓形，24 h后大部分細胞貼壁，均勻分布于瓶底，部分細胞伸出細小突起，培養(yǎng)4-5 d后細胞數(shù)量明顯增多，呈扁平、多角形，胞質(zhì)豐富且核漿較少，細胞核呈橢圓形，偏于胞體側。神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細胞組成，不僅具有支持功能，還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質(zhì)，在持神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。

方法簡介 實驗室分離的兔神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 兔神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基(基礎培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 梭形、多角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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