商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞

組織來源 腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每個半球都有三個面，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的種，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的道也是主要的道免疫防線。小膠質(zhì)細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞的20%，小膠質(zhì)細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng)，斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學研究表明激活的小膠質(zhì)細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源，如腫瘤壞死因子（TNF），氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的主要功能：①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中；②當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞；③膠質(zhì)細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。

方法簡介 實驗室分離的兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： （12 mM） 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基(基礎培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 梭形、多角形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液： （12 mM）

兔神經(jīng)小膠質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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