欧美在线视频免费Ivk视频挠I久久国产91I伊人av综合网I午夜男人天堂I中文字幕视频网I四川少妇bI91九色对白I美女131爽爽爽做爰视频I精品色呦呦I一女被两男吃奶添下aI超污视频免费观看I欧美性故事I免费大片黄I秋霞欧美视频I婷婷av色I亚洲 欧美 另类 综合 偷拍I性俱乐部折磨调教男警I欧美日韩精品一区二区天天拍I国产精品1000部啪视频I在线中文字幕日韩I亚洲毛片视频I国外性视频I三上悠亚女教师I天天av天天操I中文字幕日韩电影在线观看I欧美sssIwww.狠狠I亚洲女性喷水在线观看一区

成纖維細(xì)胞排除法操作流程

1.原代細(xì)胞機(jī)械刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭(用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲)、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用(也可用特制電熱燒灼器刮除)。刮除程序?yàn)椋?1)標(biāo)記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養(yǎng)瓶皿的背面圈下生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的部位;(2)刮除：棄掉培養(yǎng)液，把無(wú)菌膠刮伸入瓶皿中，肉眼或顯微鏡窺視下，刮除無(wú)標(biāo)記空間;(3)用Hanks液沖洗一兩次，洗除被刮掉的細(xì)胞;(4)注入培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)仍有成纖維細(xì)胞殘留，可重復(fù)刮除至*除掉為止2.反復(fù)貼壁法：根據(jù)腫瘤細(xì)胞比...

對(duì)淋巴細(xì)胞系進(jìn)行體外刺激預(yù)孵育、或板內(nèi)同步刺激培養(yǎng)

1、將抗原和淋巴細(xì)胞系在體外混合，刺激并預(yù)孵育，是通用的方法。預(yù)孵育的淋巴細(xì)胞，在置入ELISPOT板之前應(yīng)使用復(fù)溫到37℃的培養(yǎng)液清洗細(xì)胞1-2次。置入ELISPOT板以后通常在37℃培養(yǎng)5～6小時(shí)。2、對(duì)于高度特異性抗原，可以采用將淋巴細(xì)胞和抗原同時(shí)加入ELISPOT板孔中，37℃培養(yǎng)箱中，同步進(jìn)行刺激、培養(yǎng)、和細(xì)胞因子捕獲。淋巴細(xì)胞板內(nèi)同步刺激培養(yǎng)的時(shí)間通常為22～24小時(shí)。3、ELISPOT試驗(yàn)檢測(cè)的是每一個(gè)分泌細(xì)胞系因子的活化細(xì)胞。在培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中，任何移動(dòng)、震動(dòng)（...

細(xì)胞電穿孔轉(zhuǎn)染操作步驟

原代細(xì)胞對(duì)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染而言，目前主要是轉(zhuǎn)染試劑(多為脂質(zhì)體)的天下。磷酸鈣轉(zhuǎn)染的方法雖說(shuō)有些out，但有些細(xì)胞還就認(rèn)準(zhǔn)這一套。不過(guò)，對(duì)于某些淋巴細(xì)胞而言，化學(xué)方法怎么都不奏效，那我們只能采取強(qiáng)硬手段，用電穿孔的方法進(jìn)行轉(zhuǎn)染。應(yīng)用電穿孔時(shí)，一般都選擇恒定的電容，然后在不同的場(chǎng)強(qiáng)下轟擊細(xì)胞，以摸索*實(shí)驗(yàn)條件。就大多數(shù)細(xì)胞而言，在電穿孔后能有20-50%的細(xì)胞存活率就OK，足以保證DNA的成功轉(zhuǎn)染。電穿孔通常在室溫下進(jìn)行，之后將細(xì)胞置于冰上，以延長(zhǎng)原代細(xì)胞膜孔道開放的時(shí)間。與傳統(tǒng)的磷...

植物細(xì)胞質(zhì)壁分離技術(shù)分析

(1)原代細(xì)胞質(zhì)壁分離法：成長(zhǎng)的植物細(xì)胞一般具有中央液泡，在中央液泡和細(xì)胞壁之間為細(xì)胞質(zhì)的薄層及其內(nèi)外膜——液泡膜和質(zhì)膜。液泡中的胞液具有一定的溶質(zhì)勢(shì)(或稱滲透勢(shì))，而活的原生質(zhì)特別是液泡膜和質(zhì)膜則具有半透性。所以，當(dāng)細(xì)胞與外界溶液接觸時(shí)，便與外液構(gòu)成滲透系統(tǒng)，并可能發(fā)生水分的移動(dòng)。若外液的水勢(shì)低于胞液的溶質(zhì)勢(shì)，則水分外滲的結(jié)果可使原生質(zhì)隨著液泡一起收縮而脫離細(xì)胞壁，發(fā)生質(zhì)壁分離，質(zhì)壁分離的細(xì)胞與水或水勢(shì)較高的溶液接觸時(shí)，可重新吸水而是質(zhì)壁分離復(fù)原。原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟1、試劑的...

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化動(dòng)物細(xì)胞株（雜交瘤細(xì)胞、CHO細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等）大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)及其生物反應(yīng)器工程可廣泛應(yīng)用于抗體、基因重組蛋白質(zhì)藥物、病毒疫苗等生物技術(shù)產(chǎn)品的研究開發(fā)和工業(yè)化，長(zhǎng)期以來(lái)得到國(guó)家重大科技攻關(guān)計(jì)劃、863計(jì)劃等的大力支持，擁有一支精干的研究開發(fā)團(tuán)隊(duì)和一系列現(xiàn)代化設(shè)備儀器，建立了由無(wú)血清懸浮培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)過(guò)程及生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)放大與強(qiáng)化技術(shù)、大規(guī)模高密度流加和連續(xù)灌注培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)過(guò)程計(jì)算機(jī)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)與控制技術(shù)、病毒類產(chǎn)品大規(guī)模技術(shù)等核心技術(shù)組成的大規(guī)模...

人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟

人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟實(shí)驗(yàn)原理染色體是在顯微鏡下可見(jiàn)原代細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)。因此，必須獲得染色體標(biāo)本才能進(jìn)行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行核型分析。正常情況下，人體外周血淋巴細(xì)胞不再分裂，但植物血凝素（PHA）可刺激血中的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化成淋巴母細(xì)胞，使其恢復(fù)增殖能力。因此，可采取少量外周靜脈血，做短期培養(yǎng)，培養(yǎng)至72小時(shí)細(xì)胞進(jìn)入增殖旺盛期，此時(shí)加入秋水仙素抑制細(xì)胞分裂，使細(xì)胞分裂停止在中期以獲得足夠量的分裂期細(xì)胞，經(jīng)低滲、固定、制...

培養(yǎng)原代細(xì)胞時(shí)哪些問(wèn)題需要注意

培養(yǎng)原代細(xì)胞時(shí)哪些問(wèn)題需要注意1.原代細(xì)胞用1640加10%胎牛血清，有的種系用DMEM.血清要求質(zhì)量較高，在普通血清中細(xì)胞生長(zhǎng)不太好。1640用雙蒸水溶解，按說(shuō)明加入碳酸氫鈉。2.培養(yǎng)液中應(yīng)加入HEPES，起緩沖pH值的作用，否則會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)。如果用20%的HEPES，每次配培養(yǎng)液時(shí)每200ml培養(yǎng)液可加入5ml.加入HEPES后1640培養(yǎng)液顏色略呈橘黃色而非暗紅色。3.消化所用胰酶可選擇0.125%濃度，且不要消化時(shí)間太長(zhǎng)。也有研究者認(rèn)為不用胰酶，直接吹打使細(xì)胞脫壁，...

造血干細(xì)胞的基本特性

造血干細(xì)胞的基本特性造血干細(xì)胞的多向分化潛能使造血干細(xì)胞分化為各類祖細(xì)胞系,祖細(xì)胞又可以分化為各種類型的血細(xì)胞。在造血干細(xì)胞發(fā)育、成熟的過(guò)程中,除了分化為成熟的細(xì)胞,部分細(xì)胞會(huì)衰老、死亡。為了維持終生造血,造血干細(xì)胞會(huì)不斷地進(jìn)行自我更新。但是在一次次的DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂中又增加了突變的可能。在成體中,70%的HSC處于靜息狀態(tài),這種狀態(tài)可使終生存在的造血干細(xì)胞可以盡可能減少由于增殖帶來(lái)的基因組不穩(wěn)定性,降低細(xì)胞應(yīng)激帶來(lái)的傷害。當(dāng)造血干細(xì)胞受到信號(hào)刺激時(shí),靜息的造血干細(xì)胞就會(huì)...