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原代細胞如何抵抗粘膜系統二次感染？

原代細胞是機體T淋巴細胞中的一個特殊亞群，它們在淋巴組織中的比例很低，但富集于上皮粘膜系統，比如皮膚，呼吸道，腸道以及道等等。這類細胞是T細胞分化過程中形成的細胞，在胚胎發育為新生個體的過程中會逐步地向各組織遷移。其中，TCR中保守的γ鏈對于γδT細胞的遷移以及功能的實現都十分關鍵。不過，新的證據表明γδT細胞的功能，主要是IL-17的表達，可能是在其離開胸腺的時候分化產生的，而γ鏈的表達與否并不重要。不管怎樣，于γδT細胞從我們出生開始就分布在各個表皮粘膜層中，從而能夠抵抗...

構建人類原始原代細胞

這是*次成功將人類原代細胞編程至這樣的早期發育階段。這項研究有可能幫助找到有關一些生育問題病因的答案，生成關于胚胎發育zui早期的一些新見解，并有潛力在未來促使開發出新型的生殖技術。多年來研究人員一直試圖在培養皿中構建出人類原始生殖細胞。原始生殖細胞生成于胚胎發育的zui初幾個星期里，此時受精卵中的胚胎干細胞開始分化為這一非常基礎的細胞類型。一旦這些原始生殖細胞變為‘特化’細胞，它們會‘幾乎自發’地繼續朝著精子或卵子前體細胞發育。誘導多能干(iPS)細胞的誕生促使科學家們提出...

腫瘤細胞培養成纖維細胞排除法

腫瘤細胞刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲）、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為：（1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位；（2）刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸入瓶皿中，肉眼或顯微鏡窺視下，刮除無標記空間；（3）用Hanks液沖洗一兩次，洗除被刮掉的細胞；（4）注入培養液繼續培養，如發現仍有成纖維細胞殘留，可重復刮除至*除掉為止2．反復貼壁法：根據腫瘤細胞比成纖維細...

正確復蘇原代細胞的方法

原代細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢?沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態檢查的作用何在?請看下文：活力檢查–千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染，如果發現有污染毫不猶豫的丟棄!形態檢查–檢查細胞的固有形態和生長行為。凍存細胞：補充新的培養液–在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養液。在細胞長至70%單層時收獲細胞，計數活細胞數，用凍存液調整細胞密度~5x106cells/ml(根據不同的細胞類型調整)凍存液–用凍...

如何使細胞培養物快速適應無血清培養基？

許多原代細胞系容易適應無血清培養基和無蛋白培養基，而對環境要求過高的其它細胞卻難以適應變化，這就需要更為專業的方法來適應變化。而根據細胞系的特性，有兩種方法可使細胞適應無血清培養基。*種方法是連續適應/循序隔絕法；另一種方法是直接適應。一、連續適應/循序隔絕法*種方法是連續適應/循序隔絕法。通過一系列的血清還原步驟，使細胞適應無血清培養基。這是優先選用的方法，且不對細胞培養環境形成太過惡劣的變化。連續適應/循序隔絕法——方法1使原培養基內的細胞連續地經過以下幾個階段：階段1：...

兔食管上皮細胞培養步驟

原代細胞實驗材料：1.大兔的正常食管組織2.6孔培養板：用多聚賴氨酸4℃包被過夜3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素，pH7.44.手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷實驗方法：1.處死大兔，取正常食管組織放入含雙抗的PBS（pH=7.2）中反復清洗3次，以洗去組織表面的血絲及粘液；2.小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離；3.分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS（pH=7.2）反復沖洗若...

腫瘤細胞培養方法

腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1、取材：人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區，取材時盡量避免用退變組織，要挑選活力較好的部位。癌性轉移淋巴結或胸腹水是好的培養材料。取材后宜盡快進行培養，如因故不能立即培養，可貯存于4℃中，但不宜栽過24小時。2、培養基：腫瘤細胞對培養基...

應用細胞融合技術制備染色體

原代細胞實驗目的通過細胞融合技術，初步了解染色體提前凝集標本制備原理、方法及間期細胞三種時相的提前凝集染色體特點。【實驗用品】一、材料人宮頸癌上皮細胞(HeLa細胞)二、器材和儀器顯微鏡、離心機、水浴箱、熱吹風機、10ml刻度離心管、5(1/2)針頭注射器、試管架、染色槽、廢液缸、吸水紙、擦鏡紙、冰凍載玻片、香柏油瓶、記號筆、酒精燈。三、試劑50％PEG、Hanks液(pH7.4)、RPMI一1640培養基(含10％滅活小牛血清，pH7.4)10μg／ml秋水仙素，0.075...