商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔肝星狀細(xì)胞

組織來(lái)源 肝臟組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡(jiǎn)介 兔肝星狀細(xì)胞細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中的消化腺，為紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星狀細(xì)胞（HSC）又名肝貯脂細(xì)胞、生素A貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等，是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源。HSC在激活后可進(jìn)步轉(zhuǎn)化為肌成纖細(xì)胞樣細(xì)胞，各種可導(dǎo)致肝纖化的因素均將HSC作為終靶細(xì)胞。正常情況下，HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時(shí)，HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹腍SC可通過(guò)增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建，此過(guò)程也是肝纖化的中心環(huán)節(jié)。肝星狀細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi)，是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源，在肝纖化的發(fā)生中處于重要地位。肝星狀細(xì)胞是肝臟的間充質(zhì)細(xì)胞，約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群，肝星狀細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分，合成定量的膠原酶以持正常的基底膜結(jié)構(gòu)，還能通過(guò)其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外，肝星狀細(xì)胞能通過(guò)合成肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝星狀細(xì)胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA或Desmin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 兔肝星狀細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長(zhǎng)特性： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 成纖細(xì)胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液： 0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無(wú)菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過(guò)濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過(guò)濾。

通過(guò)IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液。

?注意事項(xiàng)?：消化時(shí)間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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