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兔原代細胞
YS-01X7058兔腹腔巨噬細胞規(guī)格





產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品名稱 | 兔腹腔巨噬細胞規(guī)格 | 英文名稱 | Rabbit Peritoneal Macrophages |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7058 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔腹腔巨噬細胞
組織來源 腹腔液
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 兔腹腔巨噬細胞分離自腹腔;腹腔,即軀干腹部的腔,內(nèi)襯腹膜,由體壁、橫膈膜和盆底圍成,其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應(yīng)。巨噬細胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一;腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。
方法簡介 實驗室分離的兔腹腔巨噬細胞采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔腹腔巨噬細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: (12 mM) 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 兔腹腔巨噬細胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細胞形態(tài): 巨噬細胞樣
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液: (12 mM)
兔腹腔巨噬細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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