產(chǎn)品名稱：過氧化氫（H2O2）試劑盒說明書

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測試方法:微量法、可見分光光度法

貨號：YS-01S6367

測定意義

H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體；另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。

測定原理：

H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物，在415nm有特征吸收。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

Anti-phospho-P53 (Ser15) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-human IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

鈣結(jié)合蛋白抗體 Anti-CR 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml

FANCM 英文名稱： 范可尼貧血相關(guān)蛋白M抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PI 3 Kinase p85 beta 磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

Caspase-1 人Caspase-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-DBH 多巴胺β羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NETO1 腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Human visfatin ELISA Kit 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 96T

Tubulin-Beta 英文名稱： 微管蛋白抗體(組化用抗體)Tubulin β 0.1ml

CARD14 英文名稱： 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體 0.2ml

Anti-DBH 多巴胺β羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

14-3-3 Tau 英文名稱： 14-3-3τ蛋白抗體 0.1ml

EGFR 英文名稱： 表皮生長因子受體抗體 0.1ml

磷脂酰肌醇激酶抗體 Anti-PI3K/P85 alpha 0.1ml

Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MYL9(Thr19) 磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體 規(guī)格 0.1ml

Ang- II (Angiotensin II ) 血管緊張素II抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
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