產品名稱：小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養基

規格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10269

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研

細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養基；優質胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態，細胞最好在對數生長期，細胞密度適合，剛剛發生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節約處就節約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關于“慢凍"，傳統的方法，細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途，選擇適宜的培養基，培養基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養基各種成分放入容器內，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規則細胞，貼壁培養。
NAIF1 protein/FITC 熒光素標記核凋亡誘導因子蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

 V5 tag/FITC 熒光素標記V5 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

alpha-2腎上腺素能受體抗體  ADRA2 1ml

Mouse  Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗羊IgG 0.3ml

GLUT8 英文名稱： 葡萄糖轉運蛋白8抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Proteasome 20S alpha 7 蛋白酶體PSMα7抗體 規格 0.2ml

 V5 tag/FITC 熒光素標記V5 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

CK-20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人細胞角蛋白20Multi-class antibodies規格： 48T

 Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MEP1A/Meprin alpha/PPHA 甲酸肽水解酶抗體 規格 0.1ml

Gal-6S(Human galactose-6-sulphate sulphatase) ELISA Kit 人半乳糖6酯酶 96T

RRM2 英文名稱： 核糖核苷酸還原酶亞基R2抗體 0.1ml

C1orf77 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框77抗體 0.2ml

 Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Mouse  rat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗大鼠IgG 0.3ml

G Protein alpha Inhibitor 1 英文名稱： G蛋白α抑制蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh 5HTR2C 5-羥色胺受體2C抗體 規格 0.2ml

 MPO /FITC 熒光素標記髓過氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PTN/Pleiotrophin 多效生長因子抗體 規格 0.1ml

 TTF-2/FITC 熒光素標記甲狀腺轉錄因子-2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養基16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒家族受體α-4抗體流式組化

腸出血性大腸埃希菌（Enterohaemorrhagic E. coli）鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒20次磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體流式組化

腸致病性大腸桿菌（Enteropathogenic E. coli）鑒定20次癌易感基因相關蛋白2

16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒CD90抗體流式組化

腸集聚型大腸埃希菌（Enteroaggregative E. coli）鑒定20次L-谷二乙酯鹽酸鹽

16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒D-半胱

腸侵襲性大腸桿菌（Enteroinvasive E. coli ）鑒定20次牛血紅蛋白

16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒γ-球蛋白（牛）

副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus）鑒定20次頭孢曲松鈉

16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒環孢菌素A

霍亂弧菌（Vibrio cholerae）鑒定20次2′-脫氧肌苷

16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒羥丙基-β-環糊精

耶爾森氏菌屬（Yersinia）鑒定20次羧甲基纖維素CM-32

16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒甲脒瓊脂糖凝膠4FF

沙門氏菌（Salmonella）鑒定20次亞精