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當前位置:首頁產品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
產品簡介

人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-29
廠商性質:經銷商
訪問量:427
產品型號:50T
詳細介紹在線留言

實驗過程:
一、人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
參數規格:
產品名稱:人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma hominis
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產品:
Buddleoside早老素1檢測試劑盒10mg

7,2'-二羥基-3′,4′-二基異黃 質量規格:HPLC≥98%,標準品 7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan

Tripdiolide氨汀標準品規格:規格:人晚期糖基化終末產物(AGEs)Polyclonal Antibody 0.2ml

人腫瘤壞死子可溶性受體I(TNFsRI) BPIL2  殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體規格:96T/48TAmiloride Hydrochloride規格:2gcJun氨基末端激酶檢測試盒500mg人高轉移鼻咽癌細胞系,58F細胞1x10^6cells

Gallic acid早老素2檢測試劑盒20mg

 酵母粉瓊脂/酵母提取物瓊脂/Yeast Extract Agar水中細菌總數的檢測250克國產/進口

Celastrol氨汀二硫化物標準品規格:規格:人載脂蛋白C1(APO-C1)Polyclonal Antibody 0.2ml

人基質金屬蛋白酶抑制子4(TIMP4)BPIL3  殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體規格:96T/48T規格:1gClara細胞分泌蛋白檢測試盒20mg人高轉移肺癌細胞,95D細胞1x10^6cells

5羧基四基羅丹明(單一化合物)5mg

反式丁(standard for GC) 質量規格:standard for GC (E)-2-Butenal

AntiMouse IgA Whole serum  兔抗小鼠IgA抗血清*β防御素2檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4858859

5羧基四基羅丹明(單一化合物)5mg

 神經束蛋白(NFASC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neurofascin (NFASC)

Rabbit Antirat IgG Whole serum  兔抗大鼠IgG抗血清進口、分裝生物素檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒4858859

白頭翁皂甙B45羧基四基羅丹明(單一化合物)10mg

十二(Standard for GC,≥99.5% (GC)) 質量規格:Standard for GC,≥99.5% (GC) Dodecane

C.L.E.D Medium250孕烯醇檢測試盒5mg腫瘤壞死子α檢測試盒Interleukin10
人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒白藜蘆;Resveratrol CAS號: 501360 規格: 20mg 訂購|咨詢

白楊素;Chrysin CAS號: 480400 規格: 20mg 訂購|咨詢

阿彼斯姆素;apiosylskimmi CAS號: 103529948 規格: 20mg 訂購|咨詢

澳茄新堿;Solasurine CAS號: 27028768 規格: 20mg 訂購|咨詢

7氨4香素;7aMino CAS號: 26093312 規格: 20mg 訂購|咨詢

9氨喜樹堿;9Aminocampt CAS號: 91421431 規格: 20mg 訂購|咨詢

阿馬堿;Raubasine CAS號: 483045 規格: 100mg 訂購|咨詢

阿奇;Azithromycin CAS號: 83905015 規格: 100mg 訂購|咨詢

安格洛苷C;Angoroside C CAS號: 115909223 規格: 20mg 訂購|咨詢

安五脂素;Anwuligan CAS號: 107534930 規格: 20mg 訂購|咨詢

阿卡波糖;Acarbose CAS號: 56180940 規格: 20mg 訂購|咨詢

阿多尼弗林堿; CAS號:  規格: 10mg 訂購|咨詢

D阿拉伯糖;Adonito CAS號: 488813 規格: 20mg 訂購|咨詢

艾黃素;Artemisetin CAS號: 479903 規格: 20mg 訂購|咨詢

β桉葉;βEudesmol CAS號: 51317089 規格: 20mg 訂購|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

 

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