【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明！

產(chǎn)品名稱：H2S含量測(cè)試盒說(shuō)明書

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6639

測(cè)定意義

H2S是一種新型氣態(tài)信號(hào)分子，存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)，生理濃度的H2S對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，并對(duì)自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過(guò)程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

測(cè)定原理

H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對(duì)苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán)，亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定其吸光值可計(jì)算H2S含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-SYVN1/FITC 熒光素標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-5(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 Anti-RASSF1A 0.2ml

SVH 英文名稱： 肝癌蛋白剪接變異體蛋白抗體 0.2ml

EFHC2 英文名稱： EFHC2蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MK5(Ser129) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶5抗體 規(guī)格 0.1ml

IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-5(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

GABA/BSA γ1氨基丁酸偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

Anti-HER4/ErbB4 HER4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 規(guī)格 0.1ml

HRP/Horseradish Peroxidase 辣根過(guò)氧化物酶(辣根酶) 10mg

TRP2 英文名稱： 酪酸酶相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml

c-Maf 英文名稱： 原癌基因cMAF抗體 0.2ml

Anti-HER4/ErbB4 HER4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SLTM 英文名稱： 雌誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)制器抗體 0.1ml

EGR2 英文名稱： 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白2抗體 0.1ml

神經(jīng)肽 Y抗體 Anti-NPY Neuropeptide Y) 0.1ml

Anti-SLC16A3/MCT-4/FITC 熒光素標(biāo)記MCT4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser37) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml

ACE2(Angiotensin converting enzyme 2) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
H2S含量測(cè)試盒說(shuō)明書氯化碳(光譜純,≥99.0%)鹽酸美司坦/酵母磷酸葡萄糖異構(gòu)酶（phosphoglucose isomerase；GPI）活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒

二甲基亞砜(光譜級(jí)，>99.9% (GC))喜樹(shù)堿S腺苷同型半胱氨酸核苷酶（AdoHcy nucleosidase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

二氯(光譜級(jí),≥99.9%,含50-150ppm戊烯穩(wěn)定劑)甘露組織S腺苷同型半胱氨酸核苷酶（AdoHcy nucleosidase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

1,4-二氧六環(huán)(光譜純,≥99.5%)醋酸環(huán)孕酮植物S腺苷同型半胱氨酸核苷酶（AdoHcy nucleosidase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

1,2-二氯乙烷(for spectroscopy,≥99.8%（GC))長(zhǎng)春瑞濱S腺苷同型半胱氨酸核苷酶（AdoHcy nucleosidase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

N,N-二甲基乙酰(光譜級(jí),≥99.8%(GC))果糖二磷酸鈉/酵母S腺苷同型半胱氨酸核苷酶（AdoHcy nucleosidase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

鄰二氯苯(光譜純,99%)鹽酸噻氯匹定通用型對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

二甲基亞砜(ACS,光譜級(jí))鹽酸通用型組織對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。