細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-436

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9889

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(N端抗體)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CK18 peptide 細(xì)胞角蛋白18多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體  Cdc6 0.1ml

SAMD3 英文名稱： SAMD3蛋白抗體 0.2ml

ERGI3 英文名稱： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GABBR1 (Ser923) 磷酸化gamma氨基丁酸B型受體1抗體 規(guī)格 0.1ml

CK18 peptide 細(xì)胞角蛋白18多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Gentamicin/OVA 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 2mg

 CDKN1C/p57 Kip2 周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ODF3B 外致密纖維蛋白3B抗體 規(guī)格 0.2ml

Mouse IgG Sepharose 4B 小鼠IgG親和層析柱 2ml柱床體積

TCTP 英文名稱： 翻譯控制蛋白抗體 0.1ml

CDC2L1 英文名稱： 細(xì)胞分裂周期蛋白2亞型1抗體 0.2ml

 CDKN1C/p57 Kip2 周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOXE3 英文名稱： 叉頭蛋白E3抗體 0.2ml

成纖維細(xì)胞生長因子受體2抗體  FGFR2 0.1ml

 phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標(biāo)記抗人、大、小鼠磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Stathmin 1 (Ser24) 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Goat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗羊IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-436植物脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次小鼠睪酮（T）ELISA試劑盒,

食物脂質(zhì)過氧化氫（H2O2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPO-Ab）ELISA試劑盒,

細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物（MDA）活性TBARS比色法定量檢測(cè)試劑盒50次大鼠色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒,

組織脂質(zhì)過氧化物（MDA）活性TBARS比色法定量檢測(cè)試劑盒50次大鼠髓磷脂堿性蛋白（MBP）ELISA試劑盒,

細(xì)胞脂質(zhì)氫過氧化物 （HYDROPEROXIDE；LOOH）活性50次大鼠胰高血糖素樣肽1（Glp-1）ELISA試劑盒,

二甲酚橙（XYLENOL ORANGE）比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠堿性成纖維生長因子（bFGF）ELISA試劑盒,

組織脂質(zhì)氫過氧化物 （HYDROPEROXIDE）活性50次大鼠白介素9（IL-9）ELISA試劑盒,

二甲酚橙比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠C肽（C-Peptide）ELISA試劑盒,

細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）比色法測(cè)定試劑盒20次豚鼠白介素1受體拮抗劑（IL1Ra）ELISA試劑盒,

細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）細(xì)胞流式分析試劑盒10次豬血管生成素1（ANG-1）ELISA試劑盒,

凍切片脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）熒光染色試劑盒10次雞5核苷酸酶（5-NT）ELISA試劑盒,

石蠟切片脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）熒光染色試劑盒10次兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A（MMP-2/Gelatinase A）ELISA試劑盒,

脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）ELISA定量測(cè)定試劑盒48/96次植物E（VE）ELISA試劑盒,

脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）高效液相色譜 （HPLC）分析試劑盒20次γ-L-谷氨酰-α-萘酰

細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列腺素（ISOPROSTANE）比色法測(cè)定試劑盒20次百里酚